النباتات ذات البلاستيدات المعدلة: الفرق بين النسختين

عدل الوصلات
من ويكيبيديا، الموسوعة الحرة
التعديل اللاحق ←
تم حذف المحتوى تمت إضافة المحتوى
مرئينص الويكي
أُنشئَت بترجمة الصفحة "Transplastomic plant"
(لا فرق)

نسخة 16:30، 14 مايو 2022

أمثلة بلاستيد

النبات معدل البلاستيد عبارة عن نباتات معدلة وراثياً يتم فيها تعطيل الجينات أو تعديلها أو إدخال جينات أجنبية جديدة في الحمض النووي للبلاستيدات مثل البلاستيدات مثل البلاستيدات الخضراء بدلاً من الحمض النووي DNA.

حالياً غالبية النباتات المعدلة البلاستيدات هي نتيجة تعديل البلاستيدات الخضراء بسبب ضعف التعبير في البلاستيدات الأخرى. [1] ومع ذلك فقد تم تطبيق هذه التقنية بنجاح على البلاستيدات الملونة للطماطم. [2]

يعتقد البعض أن البلاستيدات الخضراء في النباتات نشأت من حدث اجتاح بكتيريا التمثيل الضوئي (سلف البكتيريا الزرقاء) بواسطة حقيقيات النوى. [3] هناك العديد من المزايا لمعالجة DNA البلاستيدات الخضراء بسبب أصلها البكتيري. على سبيل المثال, القدرة على إدخال جينات متعددة (عوامل) في خطوة واحدة بدلاً من العديد من الخطوات و التعبير المتزامن للعديد من الجينات بنظام التعبير الجيني البكتيري. [4] تشمل المزايا الأخرى القدرة على الحصول على منتجات عضوية مثل البروتينات بتركيز عالٍ و بالحقيقة أن إنتاج هذه المنتجات لن يتأثر بالتنظيم اللاجيني. [5]

و السبب في تصنيع المنتج بتركيزات عالية هو أن خلية نباتية واحدة يمكن أن تحمل ما يصل إلى 100 بلاستيد أخضر. و إذا تم تحويل هذه البلاستيدات جميعها, فيمكنها جميعاً التعبير عن الجينات الأجنبية المدخلة. [1] و بالتالي يكون هذا مفيداً مقارنةً بالتعبير الناتج عن النواة, لأن النواة تحتوي عادةً على نسخة واحدة أو نسختين فقط من الجين. [1]

شهدت المزايا التي يوفرها التعديل على البلاستيدات الخضراء اهتماماً متزايداً في هذا المجال من البحث و التطوير, لا سيما في التطبيقات الزراعية والصيدلانية. [5] و مع ذلك, هناك بعض القيود في معالجة الحمض النووي للبلاستيدات الخضراء, مثل عدم القدرة على معالجة مادة DNA لمحاصيل الحبوب والتعبير السيئ للحمض النووي الأجنبي في البلاستيدات غير الخضراء كما ذكرنا من قبل. [5] بالإضافة إلى ذلك, قد يؤدي الافتقار إلى قدرة التعديل اللاحقة للترجمة مثل الارتباط بالجليكوزيل في البلاستيدات إلى صعوبة التعبير عن البروتين المرتبط بالإنسان. [6] ومع ذلك, فقد تم إحراز تقدم كبير في زراعة النباتات, على سبيل المثال, إنتاج لقاحات صالحة للأكل ضد التيتانوس باستخدام نبات التبغ معدل البلاستيد. [7]

إجراء التحويل و عملية الاختيار

بناء الجينات

تخطيط الكاسيت الجيني للنباتات

أول شرط لتوليد النباتات معدلة البلاستيد هو الحصول على بنية جينية مناسبة يمكن إدخالها في بلاستيد ما مثل البلاستيدات الخضراء و تكون على شكل ناقل من بلازميد الإشريكية القولونية. [8] هناك العديد من الميزات الرئيسية لشريط الجينات المناسب بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر (1) علامة اختيار (2) متواليات مرافقة (3) جين مهم (4) تسلسل محفز (5) 5' UTR (6) 3' UTR (7) العناصر المتداخلة. [9] يميل الواسم القابل للاختيار عادةً إلى أن يكون جيناً مقاوماً للمضادات الحيوية, مما يمنح الخلية النباتية القدرة على تحمل النمو في وسط أجار يحتوي على مضاد حيوي. [5] تعد التسلسلات المرافقة ضرورية لإدخال البناء الجيني في أماكن محددة مسبقاً من جينوم البلاستيد من خلال إعادة التركيب المتماثل. [4] يكون لهذا الجين المعني العديد من التطبيقات المختلفة و التي يمكن أن تتراوح من جينات مقاومة للآفات إلى إنتاج مستضد لقاح. [4] العناصر المتداخلة (IEE) مهمة لتسهيل مستويات عالية من التعبير الجيني إذا تم إدخال جينات متعددة في شكل مشغل جيني. [4] أخيراً, يعزز UTR 5 'و 3' UTR الارتباط الريبوسومي مما يزيد من استقرار النسخ على التوالي. [4]

التحول و الاختيار

الطريقة الأكثر شيوعاً للتحولات البلاستيدية هي الخصائص البيولوجية : حيث يتم تغليف جزيئات الذهب أو التنجستين الصغيرة بناقل البلازميد و إطلاقها في الخلايا النباتية الصغيرة أو أجنة النبات, مخترقة طبقات الخلايا المتعددة و في البلاستيد. [8] سيكون هناك بعد ذلك حدث إعادة تركيب متماثل بين ناقل بلازميد اللقاح و جينوم البلاستيد, ونأمل أن ينتج عنه إدخال ثابت لشريط الجينات في البلاستيد. [8] في حين أن كفاءة التحويل أقل مما هي عليه في التحول الوسيط للبكتيريا الزراعية, و هو أمر شائع أيضاً في الهندسة الوراثية النباتية, فإن قصف الجسيمات مناسب بشكل خاص لتحويل البلاستيدات الخضراء. تتضمن طرق التحويل الأخرى استخدام التحويل بوساطة البولي إيثيلين جلايكول (PEG), و الذي يتضمن إزالة جدار الخلية النباتية من أجل تعريض الخلية النباتية "العارية" للمادة الوراثية الأجنبية للتحول في وجود PEG. [8] و مع ذلك, فإن التحويل بوساطة PEG, من المعروف أنه يستغرق وقتاً طويلاً, و يحتاج تقنية عالية و يتطلب عمالة كبيرة لأنه يتطلب إزالة جدار الخلية الذي يعد مكوناً هيكلياً وقائياً رئيسياً للخلية النباتية. [10] و من المثير للاهتمام, أن ورقة بحثية صدرت في عام 2018م وصفت تحولاً ناجحاً لبلاستيد البلاستيدات الخضراء من أنواع الطحالب الدقيقة N. oceanica و C.reinhardtii من خلال التثقيب الكهربائي. [10] في حين أنه لم يتم إجراء أي دراسة حتى الآن لتحول بلاستيد للنباتات العليا باستخدام التثقيب الكهربائي, لكن قد يكون هذا مجالاً مثيراً للدراسة في المستقبل.

من أجل الثبات و المحافظة على ثبات الخلية, يجب أن يحتوي جزيء DNA البلازميد على أصل التضاعف, و الذي يسمح بتكاثره في الخلية بشكل مستقل عن الكروموسوم. عندما يتم إدخال حمض النووي غريب لأول مرة إلى الأنسجة النباتية, لن تتمكن جميع البلاستيدات الخضراء من دمج المادة الوراثية المدخلة بنجاح. [5] سيكون هناك مزيج من البلاستيدات الخضراء الطبيعية و المتحولة داخل الخلايا النباتية. يتم تعريف هذا المزيج من البلاستيدات الخضراء الطبيعية والمتحولة على أنها مجموعة البلاستيدات الخضراء " غير المتجانسة ". [5] يتطلب التعبير الجيني المستقر للجين الذي تم إدخاله مجموعة " متجانسة " من البلاستيدات الخضراء المحولة في الخلايا النباتية, حيث تنجح جميع البلاستيدات الخضراء في الخلية النباتية في دمج المادة الوراثية الغريبة. [5] عادة يمكن تحقيق المثلية في البلاستيد و تحديدها من خلال جولات متعددة من الاختيار على المضادات الحيوية. [5] حيث تتم زراعة الأنسجة النباتية المحولة عدة مرات على ألواح أجار تحو مضادات حيوية مثل سبيكتينومايسين. [5] فقط الخلايا النباتية التي نجحت في دمج شريط الجينات كما هو موضح أعلاه ستكون قادرة على التعبير عن علامة اختيار عن طريق مقاومة المضادات الحيوية و بالتالي تنمو بشكل طبيعي في وسط أجار يحتوي على مضادات حيوية. [5] النسيج النباتي الذي لا ينمو بشكل طبيعي سيكون له مظهر مبيض حيث أن المضاد الحيوي سبيكتينوميسين يثبط الريبوسومات في بلاستيدات الخلايا النباتية, و بالتالي يمنع الحفاظ على البلاستيدات الخضراء [5] .و على الرغم من ذلك هناك حاجة إلى إجراء العديد من جولات اختيار المضادات الحيوية و إعادة الزرع للحصول على نسيج نباتي متجانس و مستقر نظراً لأن التجمعات غير المتجانسة للبلاستيدات الخضراء قد تظل قادرة على النمو على لوحات أجار فعالة, . [5] يعتبر توليد أنسجة نباتية متجانسة من الصعوبات الرئيسية في زراعة الأعضاء التناسلية و يستغرق وقتاً طويلاً بشكل كبير جداً. [8]

مثال على تطعيم نبات الطماطم للأغراض الزراعية

التطعيم

بعض الأنواع النباتية مثل Nicotiana tabacum التبغ الذائع أكثر تقبلاً ل لتعديل البلاستيد مقارنة بأفراد من نفس الجنس مثل التبغ الأزرق Nicotiana glauca و تبغ بنثاميانا Nicotiana benthamiana. [11] سلطت التجربة التي أُجريت في عام 2م012 الضوء على إمكانية تسهيل عمليات تعديل البلاستيد لأنواع النباتات الصعبة باستخدام التطعيم. حيث يتم هذا التطعيم عندما يتم جمع نباتين مختلفين معاً و يستمران في النمو, و قد تم استخدام هذه التقنية على نطاق واسع في التطبيقات الزراعية و يمكن أن تحدث بشكل طبيعي في البرية. [12] تم تعديل البلاستيد الخاص بنبات التبغ الذائع N. tabacum ليكون له مقاومة للسبكتينوميسين و ومضانالبروتينات الفلورية الخضراء GFP. [11] بينما تم تعديل نوى نباتات تبغ بنثاميانا و التبغ الأزرق ليكون مقاوماً للكيناميسين. [11] تم بعد ذلك تطعيم النباتات معدلة البلاستيد و النباتات معدلة النوى وراثياً مع بعضها البعض ثم تم تحليل الأنسجة المطعمة. [11] كشف الفحص المجهري الفلوري و اختيار المضادات الحيوية في وسط أجار مع كل من كاناميسين و سبيكتينوميسين أن أنسجة النباتات المطعمة تحتوي على كل من الجينات المعدلة وراثيا و المواد النووية المعدلة وراثيا. [11] تم تأكيد ذلك بشكل أكبر من خلال تحليل تفاعل البوليمراز المتسلسل PCR. [11] سلطت هذه الدراسة الضوء على أن البلاستيدات مثل البلاستيدات الخضراء قادرة على المرور بين الخلايا عبر وصلات الطعوم و تؤدي إلى نقل المادة الوراثية بين خطين مختلفين من الخلايا النباتية. [11] هذا الاكتشاف مهم لأنه يوفر مساراً بديلاً لتوليد نباتات معدلة البلاستيد للأنواع التي لا يمكن تحويلها بسهولة باستخدام منهجيتنا التجريبية الحالية كما هو موضح أعلاه. [11]

تحسين التعبير الجيني

تمت دراسة أنظمة التعبير المحفزة مثل المحولات النظرية وبروتينات تكرار pentatricopeptide على نطاق واسع في محاولة للتحكم و تعديل التعبير عن منتجات الجينات المحورة في النباتات معدلة البلاستيد. [13] تتمثل إحدى الميزات الكبيرة في استخدام أنظمة التعبير المحرض في تحسين تركيز إنتاج البروتين المحول. [13] فعلى سبيل المثال تحتاج النباتات الصغيرة إلى تكريس الطاقة و الموارد للنمو و التطور لتصبح نباتات ناضجة. [13] و بالتالي فإن التعبير التأسيسي للجين المحول سيكون ضاراً لنمو النبات و تطوره, فهو يستهلك طاقة و موارد كبيرة للتعبير عن بناء الجين الخارجي بدلاً من ذلك. [13] وهذا من شأنه أن يؤدي إلى نقص تطور النباتات معدلة البلاستيد مع إنتاجية منخفضة. [13] سوف يتغلب التعبير المحرض عن الجينات المحورة على هذا القيد ويسمح للنبات أن ينضج تماماً مثل نبات من النوع البري الطبيعي قبل أن يتم تحريضه كيميائياً لبدء إنتاج الجين المحول والذي يمكن حصاده بعد ذلك. [13]

الاحتواء البيولوجي والتعايش الزراعي

نبتة تبغ نيكوتيانا

يجب أن تكون النباتات المعدلة وراثياً آمنة للبيئة ومناسبة للتعايش مع المحاصيل التقليدية و العضوية. هناك عقبة رئيسية أمام المحاصيل التقليدية معدلة النوى وراثياً تتمثل في التهجين المحتمل للجينات المحورة عبر حركة حبوب اللقاح. في البداية كان يعتقد أن تعديل البلاستيد, الذي ينتج نباتات معدلة البلاستيد لا ينتج حبوب لقاح فيها على الجينات المحورة, لا يؤدي فقط إلى زيادة السلامة الحيوية, بل يسهل أيضاً التعايش بين الزراعة المعدلة وراثياً و التقليدية و العضوية. لذلك كان تطوير مثل هذه المحاصيل هدفاً رئيسياً للمشاريع البحثية مثل Co-Extra و Transcontainer.

هناك دراسة أجريت على نبات تبغ في عام 2007م دحضت هذه النظرية. بقيادة رالف بوك من معهد ماكس بلانك لفيزيولوجيا النبات الجزيئي في ألمانيا, درس الباحثون التبغ المعدل وراثياً و الذي تم فيه دمج الجينات المحورة في البلاستيدات الخضراء. [14] تم تربية نبات تبغ معدل البلاستيد تم إنشاؤه من خلال التحول بوساطة البلاستيدات الخضراء مع النباتات التي كانت عقيمة للذكور مع بلاستيدات خضراء لم يمسها أحد. [14] تم تصميم النباتات معدلة البلاستيد ليكون لديها مقاومة للمضاد الحيوي سبيكتينوميسين و تم هندستها لإنتاج جزيء بروتين فلوري أخضر (GFP). [14] لذلك تم افتراض أن أي نسل ينتج من هذين الخطين من نبات التبغ يجب ألا يكون قادراً على النمو على سبيكتينوميسين أو أن يكون فلورياً, حيث يجب ألا تكون المادة الوراثية في البلاستيدات الخضراء قادرة على الانتقال عبر حبوب اللقاح. [14] ومع ذلك فقد وجد أن بعض البذور كانت مقاومة للمضاد الحيوي و يمكن أن تنبت في وسط أجار يحوي سبيكتينوميسين. [14] أظهرت الحسابات أن 1 من كل مليون حبة لقاح تحتوي على مادة وراثية للبلاستيد, و التي ستكون مهمة في البيئة الزراعية. [14] نظراً لأن التبغ لديه ميل قوي نحو الإخصاب الذاتي, فمن المفترض أن تكون موثوقية النباتات معدلة البلاستيد أعلى في ظل الظروف الطبيعية. لذلك يعتقد الباحثون أن نباتاً واحداً فقط من كل 100,000,000 من نباتات التبغ المعدلة وراثياً سينقل الجينات المحورة عبر حبوب اللقاح. هذه القيم أكثر من مرضية لضمان التعايش. و مع ذلك بالنسبة للمحاصيل المعدلة وراثياً المستخدمة في إنتاج المستحضرات الصيدلانية, أو في الحالات الأخرى التي لا يُسمح فيها مطلقاً بالتهجين, يوصي الباحثون بدمج تحويل البلاستيدات الخضراء مع طرق الاحتواء البيولوجي الأخرى, مثل عقم الذكور السيتوبلازمي أو استراتيجيات التخفيف من التحوير الجيني. أظهرت هذه الدراسة أنه في حين أن النباتات عدلة البلاستييل ا تحتوي على احتواء جيني مطلق, فإن مستوى الاحتواء مرتفع للغاية وي سمح بالتعايش بين المحاصيل الزراعية التقليدية وا لمعدلة وراثياً. [14]

هناك مخاوف عامة بشأن إمكانية انتقال الجينات المقاومة للمضادات الحيوية إلى أهداف غير مرغوب فيها بما في ذلك البكتيريا و الأعشاب الضارة. [15] نتيجة لذلك فقد تم تطوير تقنيات لإزالة الجينات المقاومة للمضادات الحيوية المختارة. إحدى هذه التقنيات التي تم تنفيذها هي نظام Cre/lox system, حيث يمكن وضع إنزيمات إعادة التركيب الجيني تحت سيطرة محفز لإزالة الجين المقاوم للمضادات الحيوية بمجرد تحقيق المثلية في عملية التحول. [16]

يرقات خنفساء البطاطس

الأمثلة والمستقبل

من الأمثلة الحديثة على تعديل البلاستيد في التطبيقات الزراعية إعطاء نباتات البطاطا الحماية من خنفساء البطاطا في كولورادو. [17] يطلق على هذه الخنفساء لقب "الآفة الخارقة" عالمياً لأنها اكتسبت مقاومة ضد العديد من المبيدات الحشرية و هي حشرات شرهة للغاية. [17] تشير التقديرات إلى أن الخنفساء تتسبب في أضرار محاصيل تصل إلى 1.4 مليون دولار أمريكي سنوياً في ميشيغان وحدها. [18] استخدمت دراسة أجريت في عام 2015م من قبل Zhang تقنية تعديل البلاستيد لإدخال الحمض النووي الريبي لإنتاج جينات محورة في جينوم البلاستيد. [17] يمنح الحمض النووي الريبي المزدوج الجديلة الحماية لنباتات البطاطا المعدلة وراثياً عبر منهجية تدخل الحمض النووي الريبي, حيث يؤدي استهلاك الأنسجة النباتية بواسطة خنفساء البطاطس إلى إسكات الجينات الرئيسية التي تتطلبها الخنفساء للبقاء على قيد الحياة. [17] كان هناك مستوى عالٍ من الحماية الممنوحة حيث كانت أوراق نبات البطاطا المعدلة غير متأذية عند تعرضها للخنافس و اليرقات البالغة. [17] كما كشف التحقيق عن فعالية قتل بنسبة 83٪ لليرقات التي أكلت أوراق نباتات معدلة البلاستيد. [17] سلطت هذه الدراسة الضوء على أنه مع اكتساب الحشرات مقاومة للمبيدات الحشرية الكيميائية التقليدية, فإن استخدام تقنية تعديل البلاستيد تقدم استراتيجيات حماية للمحاصيل بوساطة RNA يمكن أن تصبح قابلة للتطبيق بشكل متزايد في المستقبل. [17]

نهج آخر بارز يعتمد على زراعة الخلايا الجذعية هو إنتاج حمض الأرتيميسينيك من خلال نباتات التبغ العابرة للبلاستيك وهو جزيء السلائف الذي يمكن استخدامه لإنتاج مادة الأرتيميسينين. [19] العلاج المركب القائم على مادة الأرتيميسينين هو العلاج المفضل و الموصى به من قبل منظمة الصحة العالمية (منظمة الصحة العالمية) ضد الملاريا. [19] تشتق مادة الأرتيميسينين بشكل طبيعي من نبات الشيح الحولي Artemisia annua, و يمكن جمع تركيزات منخفضة فقط من مادة الأرتيميسينين في النبات بشكل طبيعي, و لا يوجد حالياً عرض كافٍ للطلب العالمي. [19] تمكنت دراسة أجريت في عام 2016م بقيادة فوينتيس, من إدخال مسار إنتاج حمض الأرتيميسينيك في البلاستيدات الخضراء ـللتبغ الذائع N. tabacum من خلال نهج علم الأحياء قبل استخدام أداة البيولوجيا التركيبية الجديدة COSTREL (combinatorial supertransformation of transplastomic recipient lines) إلى توليد نبتة نباتية من نوع التبغ الذائع ذات إنتاجية عالية جداً من حمض الأرتيمينيسين. [20] توضح هذه الدراسة الفوائد المحتملة لتعديل البلاستيد للتطبيقات الصيدلانية الحيوية في المستقبل.

على الرغم من أن عمليات تعديل البلاستيد غير قابلة للحياة في البلاستيدات غير الخضراء في الوقت الحالي, فقد ثبت أن العمل الذي يتم إجراؤه على جينوم البلاستيدات الخضراء قيم للغاية. [4] تشمل تطبيقات تحويل البلاستيدات الخضراء على سبيل المثال لا الحصر الزراعة و الوقود الحيوي و المستحضرات الصيدلانية الحيوية. [4] و ذلك بسبب عدد قليل من العوامل, و التي تشمل سهولة التعبير الجيني المتعدد في شكل عوامل و تعبير رقم النسخ العالي. [4] دراسة تعديل البلاستيد لا تزال جارية. و لا تزال هناك حاجة إلى مزيد من البحث والتطوير لتحسين المجالات الأخرى مثل زراعة البلاستيدات في البلاستيدات غير الخضراء, و عدم القدرة على تحويل محاصيل الحبوب من خلال عمليات تعديل البلاستيد و طريقة التحايل على نقص القدرة على الغلكزة في البلاستيدات الخضراء. [4] ستمنحنا التحسينات الإضافية في مجال الدراسة هذا طريقاً قوياً للتكنولوجيا الحيوية في العديد من التطبيقات المهمة في حياتنا اليومية.

مراجع

  1. ^ أ ب ت "Unsolved problems in plastid transformation". Bioengineered. ج. 3 ع. 6: 329–33. 24 نوفمبر 2012. DOI:10.4161/bioe.21452. PMID:22892591. {{استشهاد بدورية محكمة}}: الوسيط غير المعروف |PMCID= تم تجاهله يقترح استخدام |pmc= (مساعدة)
  2. ^ Ruf، S.؛ Hermann، M.؛ Berger، I.؛ Carrer، H.؛ Bock، R. (2001). "Stable genetic transformation of tomato plastids and expression of a foreign protein in fruit". Nature Biotechnology. ج. 19 ع. 9: 870–875. DOI:10.1038/nbt0901-870. PMID:11533648.
  3. ^ "Genomics and chloroplast evolution: what did cyanobacteria do for plants?". Genome Biology. ج. 4 ع. 3: 209. 2003. DOI:10.1186/gb-2003-4-3-209. PMID:12620099. {{استشهاد بدورية محكمة}}: الوسيط غير المعروف |PMCID= تم تجاهله يقترح استخدام |pmc= (مساعدة)صيانة الاستشهاد: دوي مجاني غير معلم (link)
  4. ^ أ ب ت ث ج ح خ د ذ "Recent achievements obtained by chloroplast transformation". Plant Methods. ج. 13 ع. 1: 30. 1 أبريل 2017. DOI:10.1186/s13007-017-0179-1. PMID:28428810. {{استشهاد بدورية محكمة}}: الوسيط غير المعروف |PMCID= تم تجاهله يقترح استخدام |pmc= (مساعدة)صيانة الاستشهاد: دوي مجاني غير معلم (link)
  5. ^ أ ب ت ث ج ح خ د ذ ر ز س "Challenges and perspectives in commercializing plastid transformation technology". Journal of Experimental Botany. ج. 67 ع. 21: 5945–5960. نوفمبر 2016. DOI:10.1093/jxb/erw360. PMID:27697788.
  6. ^ Faye, L.; Daniell, H. (19 Jan 2006). "Novel pathways for glycoprotein import into chloroplasts". Plant Biotechnology Journal (بالإنجليزية). 4 (3): 275–279. DOI:10.1111/j.1467-7652.2006.00188.x. ISSN:1467-7644. PMID:17147633.
  7. ^ "New advances in the production of edible plant vaccines: chloroplast expression of a tetanus vaccine antigen, TetC". Phytochemistry. ج. 65 ع. 8: 989–94. أبريل 2004. DOI:10.1016/j.phytochem.2004.03.004. PMID:15110679.
  8. ^ أ ب ت ث ج Wani, Shabir H.; Haider, Nadia; Singh, Hitesh Kumar and N. B. (31 Oct 2010). "Plant Plastid Engineering". Current Genomics (بالإنجليزية). 11 (7): 500–512. DOI:10.2174/138920210793175912. PMID:21532834. {{استشهاد بدورية محكمة}}: الوسيط غير المعروف |PMCID= تم تجاهله يقترح استخدام |pmc= (help)
  9. ^ "Chloroplast vector systems for biotechnology applications". Plant Physiology. ج. 145 ع. 4: 1129–43. ديسمبر 2007. DOI:10.1104/pp.107.106690. PMID:18056863. {{استشهاد بدورية محكمة}}: الوسيط غير المعروف |PMCID= تم تجاهله يقترح استخدام |pmc= (مساعدة)
  10. ^ أ ب Gan, Qinhua; Jiang, Jiaoyun; Han, Xiao; Wang, Shifan; Lu, Yandu (2018). "Engineering the Chloroplast Genome of Oleaginous Marine Microalga Nannochloropsis oceanica". Frontiers in Plant Science (بالإنجليزية). 9: 439. DOI:10.3389/fpls.2018.00439. ISSN:1664-462X. PMID:29696028. {{استشهاد بدورية محكمة}}: الوسيط غير المعروف |PMCID= تم تجاهله يقترح استخدام |pmc= (help)صيانة الاستشهاد: دوي مجاني غير معلم (link)
  11. ^ أ ب ت ث ج ح خ د Stegemann, Sandra; Keuthe, Mandy; Greiner, Stephan; Bock, Ralph (14 Feb 2012). "Horizontal transfer of chloroplast genomes between plant species". Proceedings of the National Academy of Sciences (بالإنجليزية). 109 (7): 2434–2438. Bibcode:2012PNAS..109.2434S. DOI:10.1073/pnas.1114076109. ISSN:0027-8424. PMID:22308367. {{استشهاد بدورية محكمة}}: الوسيط غير المعروف |PMCID= تم تجاهله يقترح استخدام |pmc= (help)
  12. ^ Goldschmidt، Eliezer E. (17 ديسمبر 2014). "Plant grafting: new mechanisms, evolutionary implications". Frontiers in Plant Science. ج. 5: 727. DOI:10.3389/fpls.2014.00727. ISSN:1664-462X. PMID:25566298. {{استشهاد بدورية محكمة}}: الوسيط غير المعروف |PMCID= تم تجاهله يقترح استخدام |pmc= (مساعدة)صيانة الاستشهاد: دوي مجاني غير معلم (link)
  13. ^ أ ب ت ث ج ح Rojas, Margarita; Yu, Qiguo; Williams-Carrier, Rosalind; Maliga, Pal; Barkan, Alice (29 Apr 2019). "Engineered PPR proteins as inducible switches to activate the expression of chloroplast transgenes". Nature Plants (بالإنجليزية). 5 (5): 505–511. DOI:10.1038/s41477-019-0412-1. ISSN:2055-0278. PMID:31036912.
  14. ^ أ ب ت ث ج ح خ "Determining the transgene containment level provided by chloroplast transformation". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. ج. 104 ع. 17: 6998–7002. أبريل 2007. DOI:10.1073/pnas.0700008104. PMID:17420459. {{استشهاد بدورية محكمة}}: الوسيط غير المعروف |PMCID= تم تجاهله يقترح استخدام |pmc= (مساعدة)
  15. ^ Puchta، Holger (1 أغسطس 2003). "Marker-free transgenic plants". Plant Cell, Tissue and Organ Culture. ج. 74 ع. 2: 123–134. DOI:10.1023/A:1023934807184.
  16. ^ "Development of selectable marker free, insect resistant, transgenic mustard (Brassica juncea) plants using Cre/lox mediated recombination". BMC Biotechnology. ج. 13 ع. 1: 88. أكتوبر 2013. DOI:10.1186/1472-6750-13-88. PMID:24144281. {{استشهاد بدورية محكمة}}: الوسيط غير المعروف |PMCID= تم تجاهله يقترح استخدام |pmc= (مساعدة)صيانة الاستشهاد: دوي مجاني غير معلم (link)
  17. ^ أ ب ت ث ج ح خ Zhang, Jiang; Khan, Sher Afzal; Hasse, Claudia; Ruf, Stephanie; Heckel, David G.; Bock, Ralph (27 Feb 2015). "Full crop protection from an insect pest by expression of long double-stranded RNAs in plastids". Science (بالإنجليزية). 347 (6225): 991–994. Bibcode:2015Sci...347..991Z. DOI:10.1126/science.1261680. ISSN:0036-8075. PMID:25722411.
  18. ^ Grafius, E. (1 Oct 1997). "Economic Impact of Insecticide Resistance in the Colorado Potato Beetle (Coleoptera: Chrysomelidae) on the Michigan Potato Industry". Journal of Economic Entomology (بالإنجليزية). 90 (5): 1144–1151. DOI:10.1093/jee/90.5.1144. ISSN:0022-0493.
  19. ^ أ ب ت Ikram، Nur K. B. K.؛ Simonsen، Henrik T. (15 نوفمبر 2017). "A Review of Biotechnological Artemisinin Production in Plants". Frontiers in Plant Science. ج. 8: 1966. DOI:10.3389/fpls.2017.01966. ISSN:1664-462X. PMID:29187859. {{استشهاد بدورية محكمة}}: الوسيط غير المعروف |PMCID= تم تجاهله يقترح استخدام |pmc= (مساعدة)صيانة الاستشهاد: دوي مجاني غير معلم (link)
  20. ^ Fuentes, Paulina; Zhou, Fei; Erban, Alexander; Karcher, Daniel; Kopka, Joachim; Bock, Ralph (14 Jun 2016). "A new synthetic biology approach allows transfer of an entire metabolic pathway from a medicinal plant to a biomass crop". eLife (بالإنجليزية). 5: e13664. DOI:10.7554/eLife.13664. ISSN:2050-084X. PMID:27296645. {{استشهاد بدورية محكمة}}: الوسيط غير المعروف |PMCID= تم تجاهله يقترح استخدام |pmc= (help)صيانة الاستشهاد: دوي مجاني غير معلم (link)

روابط خارجية

  • Co-Extra Research on the co-existence and traceability of genetically modified plants
  • Transcontainer Developing biological containment systems for genetically modified plants
مجلوبة من «https://ar.wikipedia.org/w/index.php?title=النباتات_ذات_البلاستيدات_المعدلة&oldid=58096459»