مستنبت

طبق من الأجار كمثال عن المستنبت المغذي حيث تلاحظ بأن اللون البرتقالي هو عبارة عن نمو للمستعمرات البكتيرية

المستنبت أو الوسط المغذي (بالإنجليزية: Medium or Culture Medium)‏: و هو عبارة عن وسط مغذي إما أن يكون سائل أو صلب على شكل جيل يستخدم لتنمية الأحياء الدقيقة و الخلايا و حتى النباتات الصغيرة. كما تختلف هذه المستنبتات باختلاف الهدف من التنمية بالإضافة للكائن المراد تنميته. هنالك نوعين رئيسيين من المستنبتات:

1- المزارع الخلوية : و تستخدم عدة أنواع من الخلايا المحضرة من الحيوانات أو النباتات.

2- مستنبتات الأحياء الدقيقة: و التي تستخدم لتنمية الجراثيم و الخمائر. تكون المستنبتات المغذية للأحياء الدقيقة إما على شكل مرق مغذي أو أطباق صلبة من الأغار. بعض الأحياء الدقيقة تكون حساسة وتتطلب بيئات معقدة من الاحتياجات الغذائية. فعلى سبيل المثال: الفيروسات تكون مجبرة للعيش بشكل طفيلي داخل الخلايا وتتطلب أوساطاً مغذية عبارة عن خلايا حية.

أنواع المستنبتات

مستنبتات مغذية

عبارة عن أوساط مغذية تحتوى على :

• مصدر كربون مثل الغلوكوز من أجل نمو البكتيريا
• الماء
• أملاح مختلفة ضرورية لنمو البكتيريا.
• مصدر للأحماض الأمينية و الآزوت ( مثل : لحوم العجول و عصارات الخمائر).

تكون هذه الأوساط غير محددة على اعتبار أن الحمض الأميني يحوي مجموعة من المركبات بتراكيب غير معروفة كيميائياً. تكون هذه المستنبتات للاستخدام العام في المختبرات على اعتبار قدرتها على تنمية معظم البكتيريا.

مستنبتات منمية أو أساسية

و هي عبارة عن أوساط تحتوى على الحد الأدنى من عناصر النمو وغالباً بدون أحماض أمينية. تتكون هذه الأوساط من:

• مصدر كربون لدعم نمو البكتريا مثل الغلوكوز أو السكونيت، و الذي يتعبر أقل غنىً بالطاقة من سابقه.
• أملاح متنوعة تكون مختلفة باختلاف نوع البكتريا وشروط النمو. و غالباً ما تكون مغنزيوم و آزوت و فسفور و الكبريت. حيث تكون أساسية للبكتيريا لتركيب البروتين و الأحماض النووية.
• ماء.

كما يوجد المنبت المنمي المضاف إليه بعض المواد المغذية الانتقائية كحمض أميني أو سكر. حيث تسمح بنمو البكتيريا المعدلة وراثياً عونية التغذية.

مستنبتات انتقائية

تُستخدم كريات دم حمراء الموجودة على طبق آجار لتشخيص العدوى. الطَبق الأيسر يُظهر عدوى موجبة بالمكورات العنقودية، أما الطبق الأيمن يُظهر عدوى موجبة بالبكتيريا العقدية مع وجود تأثير الهالة الذي يُظهر حالة الدم-بيتا للمجموعة أ. هذه العدوى قد تحصل للمرضى الخاضعين للعلاج الكيميائي.

تستخدم من أجل نمو متعضيات معينة. فعلى سبيل المثال إذا كانت المتعضية مقاومة لمضاد حيوي معين فيتم إضافة ذلك المضاد للمستنبت وبالتالي يمنع نمو المتعضية الغير مقاومة بينما يسمح بنمو المقاومة.

كما تستخدم أيضاً في المزارع الخلوية وذلك لضمان استمرارية نمو أو تكاثر الخلايا الحاملة لمواصفات معينة ( كالمقاومة لمضاد حيوي معين أو القدرة على تصنيع مواد استقلابية معينة). و بشكل شائع فإن المنابت الانتقائية المستخدمة لتنمية الخلايا التابعة لحقيقيات النوى تحتوي على النيومايسين لانتقاء الخلايا المعدلة جينياً بإدخال بلازميد حاوي على جين مقاوم لنيومايسين كمعلم جيني.

بعض الأمثلة على المنابت الانتقائية:

• أزرق الإيزومثلين أجار (EMB) الحاوي على أزرق المثلين القاتل للجراثيم إيجابية الغرام والذي يسمح فقط بنمو الجراثيم سلبية الغرام.
• منبت الخمائر والفطريات (YM) الذي يتميز بباهاء منخفض مما يثبط نمو الجراثيم.
• الأغار الدموي ويستخدم في فصح المكورات العقدية. يحوي هذا المستنبت على دم قلب العجول والتي تصبح شفافة عند وجود المكورات العقدية المحللة للدم.
• مستنبت أغار ماكونكي لفصح البكتريا سلبية الغرام.
• مستنبت هيكتون المعوي (HE) المستخدم في عزل البكتيريا سلبية الغرام.
• مستنبت أغار أملاح المانيتول (MSA) و هو انتقائي للجراثيم الإيجابية.
• مرق تيرفيك (TB) يستخدم مع الجليسيرول في تحضين العترات المعدلة وراثياً من الإيشريشيا كولي.
• مستنبت دارئ خلاصة الخميرة والفحم و الني يعتبر انتقائي لجراثيم معينة سلبية الغرام وبخاصة الفيلقية.